Khái niệm cơ bản về dihydromyricetin

Dihydromyricetin là một chất ức chế dihydropyrimidase mạnh với IC50 là 48 μM. Dihydromyricetin kích hoạt quá trình tự thực bằng cách ức chế tín hiệu mTOR. Dihydromyricetin ức chế sự hình thành phức hợp mTOR (mTORC1/2).

Đích:Dihydropyrimidinase: 48 μM (IC50);mTORC1;mTORC2;Autophagy

Các nghiên cứu in vitro: Dihydromyricetin, một flavonol, ức chế đáng kể hoạt động xúc tác của dihydropyrimidase đối vớichất nền tự nhiên dihydrouracil và chất nền xenobiotic 5-propyl-hydantoin. Dihydromyricetin cho thấy tác dụng ức chế đáng kể đối với hoạt động của dihydropyrimidase trên cả hai cơ chất, thậm chí còn hơn cả myricetin. Giá trị IC50 của dihydromyricetin đối với dihydropyrimidase được xác định bằng cách sử dụng đường cong chuẩn độ của dihydrouracil và 5-propylhydantoin lần lượt là 48±2 và 40±2 μM[1]. Việc bổ sung dihydromyricetin (DHM) đã đảo ngược đáng kể sự gia tăng quá trình phosphoryl hóa mTOR ở Ser2448 (p-mTOR) trong quá trình sử dụng D-gal, cho thấy rằng dihydromyricetin có thể kích hoạt quá trình tự thực bằng cách ức chế tín hiệu mTOR.

Nghiên cứu in vivo : Nhóm đối chứng bình thường, nhóm D-gal, nhóm D-gal cộng với dihydromyricetin (100 mg/kg), nhóm D-gal cộng với dihydromyricetin (200 mg/kg) được đánh giá bằng mê cung nước Morris (MWM) khả năng học tập và trí nhớ ở chuột) (n=10 mỗi nhóm). Điều trị bằng dihydromyricetin (DHM) rút ngắn đáng kể độ trễ thoát so với nhóm mô hình do D-gal gây ra.

Độ hòa tan:Trong ống nghiệm:DMSO: Lớn hơn hoặc bằng 100 mg/mL (312,26 mM)," Lớn hơn hoặc bằng " có nghĩa là hòa tan, nhưng độ bão hòa không xác định. Trong cơ thể sống: 1. Thêm từng dung môi một: 10 phần trăm DMSO 90 phần trăm (20 phần trăm SBE- -CD trong nước muối) Độ hòa tan: Lớn hơn hoặc bằng 2,5 mg/mL (7,81 mM); dung dịch trong suốt 2. Thêm từng dung môi một: 10 phần trăm DMSO 40 phần trăm PEG300 5 phần trăm Tween-80 45 phần trăm Nước muối Độ hòa tan: Lớn hơn hoặc bằng 2,5 mg/mL (7,81 mM); Dung dịch trong 3. Thêm lần lượt từng dung môi: 10 phần trăm DMSO 90 phần trăm Dầu ngô Độ hòa tan: Lớn hơn hoặc bằng 2,5 mg/mL (7,81 mM); giải pháp rõ ràng.

Giải pháp chứng khoán:

1 mM 3,1226 mL 15,6128 mL 31,2256 mL

5 mM 0.6245 mL 3,1226 mL 6,2451 mL

10 mM 0,3123 mL 1,5613 mL 3,1226 mL

Xét nghiệm Kinase: Xét nghiệm đo quang phổ nhanh được sử dụng để xác định hoạt tính enzym của hydantoinase, allantoinase, dihydrotyrosinase và iminase. Dihydrouracil, {{0}}propyl-hydantoin và phthalimide được sử dụng làm chất nền. Trừ khi có quy định rõ ràng khác, dihydrouracil (2 mM) đã được sử dụng làm cơ chất trong xét nghiệm tiêu chuẩn cho dihydropyrimidase. Tóm lại, sự giảm độ hấp thụ ở 230, 248 và 298 nm được đo khi thủy phân dihydrouracil, 5-propyl-hydantoin và phthalimide làm cơ chất ở 25 độ tương ứng. Để bắt đầu phản ứng, dihydropyrimidase tinh khiết (10-70 ug) đã được thêm vào 2 mL dung dịch chứa chất nền và 100 mM Tris-HCl (pH 8.0 ). Quá trình thủy phân chất nền được theo dõi bằng máy quang phổ UV/vis. Hệ số tắt của từng chất nền được xác định bằng thực nghiệm bằng phép đo trực tiếp bằng máy đo quang phổ. Hệ số tắt của dihydrouracil, 5-propyl-hydantoin và phthalimide là 0,683 mM-1 cm-1 ở 230 nm, 0,0538 mM-1 cm-1 ở 248 nm , và 0,0538 mM-1 cm-1 ở 298 nm, tương ứng ở 3,12mM-1cm-1. Tốc độ thay đổi ban đầu là một hàm của nồng độ enzyme trong khoảng độ hấp thụ là 0.01-0.18 phút-1. Đơn vị hoạt tính được định nghĩa là lượng enzyme xúc tác quá trình thủy phân của 1 μmol cơ chất mỗi phút và hoạt tính cụ thể được biểu thị bằng đơn vị hoạt tính trên mỗi mg enzyme. Các tham số động học Km và Vmax được xác định từ các biểu đồ phi tuyến tính bằng cách khớp tốc độ thủy phân từ các thí nghiệm riêng lẻ với phương trình Michaelis-Menten .

Thí nghiệm tế bào: Các mẫu mô vùng đồi thị và vỏ não được ly giải trong dung dịch đệm ly giải chứa 20 mM Tris (pH 7,5), 135 mM NaCl, 2 mM EDTA, 2 mM DTT, 25 mM -glycerophosphate, 2 mM natri pyrophosphate, 10% glycerol, 1% Đồng nhất Triton X. -100, 1 mM natri orthovanadate, 10 mM NaF, 10 ug/mL aprotinin, 10 ug/mL leupeptin và 1 mM PMSF trên đá trong 30 phút và ly tâm ở 12000 xg, 4 độ trong 30 phút. Chất nổi trên bề mặt được thu thập và định lượng protein được thực hiện bằng bộ BCA. Các mẫu protein được đun sôi trong 5 phút ở 95 độ với sự có mặt của dung dịch đệm mẫu. Các protein mục tiêu được phân tách bằng điện di trên gel natri dodecyl sulfat polyacrylamide (SDS-PAGE), được chuyển đến màng nitrocellulose và thử nghiệm với các kháng thể sơ cấp và thứ cấp tương ứng. Cuối cùng, trực quan hóa protein mục tiêu bằng cách tiếp xúc với phim tia X bằng thuốc thử phát quang hóa học tăng cường (ECL).

Thí nghiệm trên động vật: Chuột 40 con chuột đực Sprague-Dawley (SD) (tuổi: 8 tuần tuổi; trọng lượng cơ thể: 160 ± 20 g) đã được sử dụng. Chuột được chia ngẫu nhiên thành 4 nhóm, bao gồm nhóm đối chứng bình thường, nhóm mô hình D-gal và D-gal kết hợp với DHM, với liều lần lượt là 100 và 200 mg/kg-d, với 10 con chuột trong mỗi nhóm. nhóm. Tất cả chuột được nhốt trong môi trường có nhiệt độ phòng là 22 ± 2 độ và chu kỳ sáng tối (12 giờ: 12 giờ) với khả năng tiếp cận thức ăn và nước uống tự do. Sau 1 tuần thích nghi với môi trường mới, những con chuột thuộc nhóm DHM được cho uống bằng ống thông với liều lượng DHM được chỉ định hòa tan trong nước cất mỗi ngày một lần vào lúc 8:00 sáng trong 6 tuần liên tiếp. Chuột từ nhóm đối chứng bình thường được cho uống nước cất. Ngoại trừ nhóm đối chứng bình thường, chuột ở các nhóm khác được tiêm D-gal dưới da với liều 150 mg/kg.d trong 6 tuần liên tiếp. Mỗi lần tiêm DHM nên cách 2 giờ trước khi tiêm D-gal.

Vận chuyển: nhiệt độ phòng; có thể thay đổi

98 phần trăm

1. Giao hàng nhanh. Đảm bảo chất lượng

2. Đội ngũ R&D của chúng tôi bao gồm các sinh viên tốt nghiệp sau tiến sĩ, sinh học và thực phẩm với khả năng R&D độc lập.

3. Cung cấp dịch vụ đóng gói tùy chỉnh. Dịch vụ OEM bao gồm: viên nang mềm, viên nang, viên nén, gói, hạt, v.v. Dịch vụ sản xuất các sản phẩm dành riêng cho khách hàng với hơn 100 khách hàng trên toàn thế giới.

4. Hơn 10 năm kinh nghiệm trong việc sản xuất thuốc thảo dược theo tiêu chuẩn GMP. Kinh nghiệm đầy đủ về kiểm soát và ứng dụng chất lượng chiết xuất thảo dược.